实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental Autoimmune Encephalomyelitis, EAE)是研究多发性硬化症(Multiple Sclerosis, MS)的金标准动物模型。通过模拟自身免疫性T细胞对中枢神经系统(CNS)的攻击,EAE模型在再现MS的神经炎症、脱髓鞘及神经功能障碍等核心病理特征方面发挥了重要作用。EAE模型广泛应用于MS发病机制研究、神经免疫调节药物筛选(如Roflumilast)、髓鞘修复及神经保护疗法的开发等领域。
爱必信致力于生物医疗的创新,凭借强大的研发实力和严格的质量控制体系,打造了高稳定性、高重复性的EAE模型研究全套试剂组合。我们的造模核心试剂具备以下优势:
- 现货速发:百日咳毒素在国内现货,纯度高达99%,性价比极佳。
- 高发病率:C57BL/6小鼠在免疫后10-14天内稳定发病,临床评分达到2-4分。
- 病理重现性好:明确髓鞘脱失(LFB染色)和Th17细胞浸润(流式验证)。
- 多维评价体系:支持临床评分、行为学、组织病理学和分子生物学的全维度验证。
EAE模型核心试剂
(1) 免疫原(抗原):MOG₃₅₋₅₅(髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55肽段),来源于人工合成肽,模拟MS中的自身抗原,浓度通常为150-300μg/只小鼠(溶于PBS、生理盐水或CFA中)。
(2) 佐剂:完全弗氏佐剂(CFA),由矿物油和灭活结核分枝杆菌(如Mycobacterium tuberculosis H37Ra,浓度为4-5mg/mL)组成,用于增强免疫应答。
(3) 免疫增强剂:百日咳毒素(Pertussis Toxin, PTX),剂量为200-500ng/只小鼠(腹腔注射),于免疫当天(第0天)及第2天再次注射,以促进T细胞浸润中枢神经系统。
EAE模型诱导方法
实验准备包括选用6-8周龄的雌性C57BL/6小鼠或Sprague-Dawley大鼠,确保持有至少10只动物以确保实验的统计学意义。将动物放置于稳定的实验环境中适应1周。
在第0天,准备乳剂:将300μg MOG₃₅₋₅₅肽和300μL CFA混合乳化后,分两次(每侧100μL)皮下注射于小鼠双侧腋窝、腹股沟和背部。同时进行PTX的腹腔注射。
在第2天,重复PTX的腹腔注射,以巩固免疫效果。
EAE模型的验证
验证EAE模型需进行临床评估、行为学、组织病理学及分子生物学等多维度检测。临床评分采用0-5分的标准化评分系统,监测小鼠在实验期间的表现及体重变化,以确认模型的成功与否。
行为学检测包括运动功能评估和抑郁样行为检测,通过转棒实验和强迫游泳实验等方法进行定量分析。
组织病理学验证通过取材和处理,进行HE染色和LFB染色等,以检测炎性细胞浸润和髓鞘脱失情况。
分子生物学验证使用流式细胞术和ELISA等方法,分析细胞亚群和细胞因子表达,进一步探讨MS的发病机制。
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特色应用案例
东南大学医学院神经精神病学研究所附属中大医院的张志珺教授团队利用EAE大鼠模型研究Roflumilast的作用,发现其可能改善MS相关抑郁和运动障碍,这一发现为进一步阐明MS和抑郁症的发病机制提供了重要线索。
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